020
case 02
アドバイス
図は一目見てポイントがつかめるよう
シンプルにしよう
添削例
（概要）
本研究の目的は、129系統ES細胞が血清条件下で安定に自己複製できる理由を明らかにす
ある。これまでに申請者は、GSK3/MAPK 阻害剤を含む無血清 2i培地を用いて、血清条件下
複製できる系統（129系統）とできない系統（NOD 系統）からES細胞を勘立
にした。①129-ES細胞では血清条件下でサイトカイン LIF の標的である転写因子 TFCP
ている、②TFCP の過剰発現により、NODES細胞は血清条件下で STAT3 依存性に自己複
る。そこで、本研究ではTFCP の機能を解析し、ES 細胞の血清条件下での自己複製の獲得と維持
構を明らかにする。これにより、ヒトを含む動物種に山並みむ的のみなし性が可
能になり、再生医療に大きく貢献できると考えていう
図中の文章が多く、また図自体
からも複雑な印象を受ける
（本文）
（1） 本研究の学術的背景
申請者は、2i培養法を用いてマウス系統
（129SV、C57BL/6, CBA/ca, FVB/N、Msm お
よび NOD）からES 細胞を独自に相立し、検討
した結果、以下のことが明らかとなっている（右
図参照）。
1） 異なったマウス系統由来 ES細胞は、サイト
カイン LIF に対して異なった応答性を示す：すな
わち、血清条件下での自己複製が可能な系統の ES
細胞（129、B6 系統）では、LIF-STAT3 標的遺伝
子が強く誘導されるが、できない系統の ES細胞
（CBA/ca、FVB/N、NOD 系統）では弱いことを
報告した（Kojina Development 2015）。
2）転与因子 TFCPの過剰発現で NOD-ES 細胞
は血清条件下で自己複製が可能となる：マイクロ
アレイを用いた遺伝子発現解析により、短期間の
血清条件下で 129-ES細胞に高発現しているが、
NOD-ES細胞では消失する遺伝子を探索し、LIF
の標的遺伝子である転写因子 TFCP を同定した。
このTFCP の過剰発現により、NOD-ES 細胞は血
清条件下で自己複製でき、かつ LIF 標的遺伝子の
誘導（LIF 応答性）の特徴も 129-ES 型に転換して
いた。
3） TFCP は ES 細胞の自己複製に必須である：
129-ES細胞のTFCP ノックアウト（KO）ES細胞
は、血清条件下で細胞死に陥る（未発表）。
着想に至った経緯および予備実験の結果のまとめ
1）血清条件下でのES細胞の掛立と維持におけるマウス系統差
マウス系統によりLF-STAT3標的遺伝子の誘導に差がある、
すなわち、129-ES細胞では強く、NOD-ES細胞では弱い
（Kojima Development 2015）
可能なマウス系統
できないマウス系統
（129-ES細胞）
（NOD-ES細胞）
LIF
LIF
STAT3
STAT3
自己複製
分化/番胞死
2）129-とNOD-ES細胞の遺伝発現の比較（血清条件下）による
転写因子 TFCP の同定
ES細胞において血清条件下の TFCPの発現は、
①129-ES細胞で高く、MOD-ES細胞では消失する
NOD-ES細胞において、TFCPの発現により
CLIF応答性が129-ES型へ変換される
③血清条件下での自己複製が可能となる
3）TFCPはES細胞の自己複製に必類である
129-ES細胞において、TFCP KO-ES細胞は細胞死に陥る
4）TFCPとSTAT3との協額作用による遺伝子発現制街
ES細胞における
TFCP 結合部位
（GSM288350）
TFCP とSTAT3の
ChiP-Seaデータのメタ
解析から、両者が結合
するゲノム領域には自
STAT3結合部位
（GSM288353）
Oct4
Sox2
Nanog
など
己複製に必額な遺伝子
が含まれる